Вся электронная библиотека >>>

 Кормление животных >>>

       

 

Минеральные вещества, витамины, биостимуляторы в кормлении сельскохозяйственных животных


Раздел: Кормление животных

   

4.1.7. Определение активности антибиотика

  

 

Для количественного определения активности антибиотических веществ, содержание которых часто сравнительно низко, существуют различные биологические, а также химические и физические методы.

 

            Химические методы

Применение химических методов количественного определения антибиотиков возможно лишь при точном зпапии химического строения, поскольку любым методом обнаруживаются в молекуле отдельные реакционные группы. По их концентрации затем рассчитывают концентрацию антибиотика. Так поступают при определении стрептомицина мальтольпым методом по содержанию стрептозы, при йодометрическом определении пенициллинов и др. Химические методы имеют тот недостаток, что вместе с активными соединениями определяются и неактивные, если в них содержатся реакциоппоспособные группы. Кроме того, компоненты сложного природного субстрата могут мешать определению.

 

            Физические методы

Физические методы определения применимы в отношении только тех антибиотиков, которые имеют характерную окраску или другие специфические физические, главным образом оптические свойства. Так, гризеофульвин можно определять по оптическому вращению, акти- номпцины — колориметрически, полиеновые антибиотики — по поглощению в ультрафиолетовой и инфракрасной областях спектра.

 

            Биологические методы

Биологические методы определения аптибиотиков весьма чувствительны и высокосиецифичны, поскольку учитывается истинное действие биологически активного соединения. Именно поэтому фармакопеи различных государств предписывают биологические методы для оценки концентрации действующего начала в препаратах антибиотиков. Существуют три группы методов биологического определения.

При методах разведепия две серии арифметически или геометрически разбавленной жидкой пробы и стандартного раствора аптибиоти-

ка засевают одним и тем же количеством микроорганизмов данного вида или штамма. Активпость антибиотика выражают той наименьшей концентрацией, при которой подавляется рост или другие регистрируемые функции испытуемого организма. Разведение можно применять при определении активпости антибиотиков, плохо диффундирующих в водной среде. Однако это связано с довольно большими расходами.

При турбидиметри- ч е е к и х методах подавлепие роста испытуемого организма регистрируют фотометрически по мутности -суспензии

или поглощению света в жидкой среде, к которой было добавлено известное количество раствора исследуемого антибиотика. Показатели измерений прямо пропорциональны концентрации антибиотика. Сначала вносят стандартный препарат антибиотика различных концентраций, фотометрически определяют мутность и строят калибровочную кривую. Затем при тех же условиях определяют мутность после добавления испытуемого препарата.

По сравнению с другими методами турбидиметрия имеет преимущества, заключающиеся в объективном измерении и коротком времени инкубации. Однако определяемые объекты пе должны образовывать конгломераты.

Д и ф ф у з и о п п ы е методы основаны па способности раствора апти- биотика диффундировать в плотной агаровой среде, засеянной испытуемым микроорганизмом, и подавлять его рост. После инкубации агаровых пластинок в местах нанесения раствора антибиотика видны зоны подавления роста, простирающиеся до границы пропикновения антибиотика. Во время диффузий, идущей во всех направлениях от точки старта, концентрация антибиотика уменьшается приблизительно пропорциопальпо квадрату расстояпия. Испытуемые микроорганизмы имеют порог чувствительности, ниже которого подавления роста пе происходит ( 4.5).

Диаметр зопы подавления может служить показателем концентрации антибиотика в растворе. Существует линейное соотношение между величиной диаметра и логарифмом концентрации антибиотика. Антибиотическую активпость определяют сравнением диаметра зопы подавления в пробе с диаметрами, полученными, по крайней мере, при двух разведениях стапдартпого (калибровочного) раствора.

Чаще всего используют диффузию веществ, введенных в отверстия в агаре. В агаре, разлитом плоским слоем и засеянном микроорганизмами, делают большие круглые отверстия одипаковой величины. В отверстия вносят равные объемы испытуемых растворов и стандартного раствора, различного разведения. После инкубации пластинок но диаметрам зон подавления рассчитывают концентрацию антибиотика в пробах.

 

 

 

СОДЕРЖАНИЕ:  Минеральные вещества, витамины, биостимуляторы в кормлении животных

 

Смотрите также:

 

Основные методы лечения инфекционных больных

Существующие методы определения, степени чувствительности микробов к антибиотикам
Активность антибиотика, его средняя терапевтическая доза...

 

Общие принципы лечения в хирургии

Определение групповой совместимости, определение резус-фактора
— Какой из представленных ниже антибиотиков снижает активность генарина: пеницилин...

 

АНТИБИОТИКИ вещества, являющиеся продуктами...

...те антибиотики, к-рые максимально соответствуют следующим требованиям: высокая протн-вомикробная активность, устойчивость в биол. средах, низкая...

 

Полиеновые антибиотики - И. М. ТЕРЕШИН...

С тех пор полиеновые антибиотики с успехом используются не только в медицине
в природе, это вещества различной химической структуры и биологической активности.