 |
|
|
БИОЛОГИЯ ПОЧВ |
Глава 3. ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ И ПРИКЛАДНЫЕ АСПЕКТЫ БИОЛОГИИ ПОЧВ
|
Смотрите также:
Мейен - Из истории растительных династий
Биографии биологов, почвоведов
|
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ БИОЦЕНОЗОВ И БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПОЧВ
ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ПОЧВЕННОЙ БИОТЫ
Метод стекол обрастания. «Микробный пейзаж» может быть получен методом стекол обрастания Росси — Холодного, который заключается в следующем. В небольшом почвенном разрезе одну из стенок зачищают и, делая ножом вертикальную щель, закладывают в нее стерильные предметные стекла, плотно прижимая их к почве. Закапывают разрез, отмечая колышком местонахождение препаратов. Если почва содержит достаточно влаги, то закопанное стекло вскоре покрывается почвенным раствором, к его поверхности прилипают коллоидные частички органического и минерального происхождения. В этой среде поселяются и активно развиваются различные микроорганизмы, образующие на стеклах характерные для данной почвы микропейзажи. По истечении срока экспозиции (не менее одного месяца) стекло осторожно отделяют от почвы (не скользящим движением), подсушивают на воздухе, фиксируют в пламени горелки, отмывают осторожно препарат водой от крупных частиц почвы (для этого можно оставить стекло в стакане с водой в наклонном положении на несколько часов), окрашивают 1%-ным карболовым эритрозином в течение 1 ч во влажной камере, промывают дистиллированной водой, высушивают и микроскопируют. Метод широко применяется в микробиологической практике. С помощью этого метода впервые оказалось возможным наблюдение за распределением различных микроорганизмов в их природной среде обитания, наблюдение за формой и размерами группировок микроорганизмов, их взаимоотношениями.
Модификация метода заключается в том, что стекла перед помещением в почву покрывают какой-нибудь питательной средой (крах- мало-аммиачным агаром, например, согласно модификации А. В. Ры- балкиной и Е. В. Кононенко) или специфическим субстратом (например, фильтровальной бумагой, льняной тканью и т. д.).
Метод капиллярных педоскопов. В естественных условиях развитие микроорганизмов происходит в основном в почвенных капиллярах, к стенкам которых прикрепляются. почвенные микроорганизмы. Исходя из этого положения, Б. В. Перфильев и Д. Р. Габе (1961) предложили использовать для наблюдения за живой почвенной микрофлорой капилляры с плоокопараллельными стенками. Был сконструирован специальный прибор — педоскоп, состоящий из набора таких капилляров.
Стерильные педоскопы вставляют в почву с помощью специального пробойника так, чтобы каналы капиллярных ячеек приняли вертикальное положение, т. е. соответствовали преобладающему направлению тока почвенного раствора. Экспозиция педоскопов в почве длится обычно в течение месяца, после чего педоскопы вынимают из почвы, очищают снаружи от почвенных частичек и рассматривают под микроскопом с иммерсионной системой объектива. Микробы в иедоскопах могут быть зафиксированы и окрашены. Фиксируют их в парах осмиевой кислоты или в парах 40%-ного раствора формалина. Окрашивают 1%-ным раствором карболового эритрозина, промывают водой.
Модификация метода, предложенная Т. В. Аристовской, состоит в том, что внутренние стенки капилляров покрывают средой, содержащей ту или иную фракцию гуминовых кислот. 50 г почвы заливают 1 л 0,1 н. раствора NaOH и через 18—20 ч отфильтровывают. Реакция среды должна быть слабокислой, рН фильтрата осторожно доводят 0,2 н. НС1 до 5. Затем в фильтрат по капле прибавляют 20%-ный раствор FeCU до полного выпадения гумусовых веществ в форме геля, который отфильтровывают и отмывают от следов хлора (проба с 1%-ным раствором AgN03). Около 5 мл геля растирают в ступке, взбалтывают в 1 л воды, вносят в 0,1%-ный раствор агара и стерилизуют. Педоскоп боковой стороной помещают в расплавленную среду, тщательно протирают снаружи стерильной ватой, подсушивают.
Метод люминесцентно-микроскопического наблюдения микроорганизмов в почвенных монолитах по Звягинцеву. Приготовляют цилиндрическую формочку размером 1x1 см из нержавеющей стали, пластмассы или стекла, имеющую острые края. Вдавливают формочку в почву исследуемого горизонта и осторожно вынимакгг ее так, чтобы над краями формочки возвышался слой'почвы. Острой бритвой срезают почву, чтобы верхняя грань монолита была на уровне краев формочки. На поверхность почвы капают раствор акридина оранжевого и накрывают ее очень тонким покровным стеклом (0,10—0,12 мм). Через 10—20 мин исследуют в люминесцентном микроскопе с иммерсионным объективом (90Х) в отраженном свете. Основные трудности метода заключаются в подборе подходящей концентрации красителя; для каждой почвы она подбирается опытным путем.
|
|
|
|
К содержанию книги: И. П. БАБЬЕВА, Г. М. ЗЕНОВА, Д.Г.ЗВЯГИНЦЕВ
|
Последние добавления:
Вильямс. Травопольная система земледелия
Качинский - Жизнь и свойства почвы
Вернадский - химическое строение биосферы