 |
|
|
БИОЛОГИЯ ПОЧВ |
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЬНЫХ ГРУПП ПОЧВЕННЫХ ОРГАНИЗМОВ
|
Смотрите также:
Мейен - Из истории растительных династий
Биографии биологов, почвоведов
|
Почвенные дрожжи
Наиболее широко используемой средой для выделения дрожжей является солодовое сусло. Из синтетических сред используют агар Сабуро, называемый также глюкозо-пептонной средой (г/л): глюкоза — 40; пептон — 10; агар — 20.
Для подавления роста бактерий и актиномицетов среды для выделения дрожжей подкисляют до рН 4,5 путем добавления к ним минеральных или органических кислот. Для синтетических сред используют соляную кислоту, для сусловых — молочную или лимонную. Для подкисле- ния заводского солодового сусла (6—8% СВ) обычно требуется 3— 4 м/л концентрированной молочной кислоты. Кислоты добавляют в жидкую или расплавленную агаризован- ную среду после стерилизации, непосредственно перед засевом или перед разливкой в чашки Петри. Если использовать 3% агара, то среда застывает при рН 4,8.
При выделении мезофильных дрожжей инкубацию производят при 20— 26—28°, при выделении психрофиль* ных форм — при 5°. Сроки инкубации зависят от температуры. При 28° — 39. Обрастания комочков почвы 4—5 дней, при 5° — не менее 14 сут. липомицетами на среде Эшби В посевах из почвы, инкубируемых при низких температурах, удается учесть в 2—3 раза больше дрожжей, чем при 28°, так как росту дрожжевых колоний при этом не мешают грибы. Учет опытов производят через 2 нед и через месяц.
Дрожжи рода Lipomyces выделяют методом посева почвенных комочков на безазотистую среду Эшби с сахарозой (см. с. 171). Дрожжевые колонии в виде слизистых молочно-белых обрастаний появляются вокруг комочков почвы через 15—20 сут ( 39).
Методы исследования чистых культур дрожжей.
Для описания культуральных признаков дрожжей используют сусло-агар и глюкозо- пептонный агар с дрожжевым автолизатом (0,5%). При описании колоний дрожжей отмечают размер колонии, ее цвет, консистенцию. Можно описывать не колонии, а рост по штриху. Посев производят прямым штрихом в пробирке со скошенным агаром. Описывают характер роста через 6—8 сут инкубации при 25°, а в случае медленно растущих форм описание делают через 8 сут, а через 6 недель его повторяют. Длительное выращивание производят при комнатной, температуре (17—18°). При описании роста дрожжей в жидких средах в пробирках отмечают помутнение среды, образование кольца или пленки.
Форму и размер клеток описывают в культурах разного возраста на плотных и жидких средах. Первый просмотр и измерение клеток производят после 2—3-суточного инкубирования при 25—28°. Если дрожжи растут медленно или не дают роста при температуре выше 20°, то первое описание делают через 2—3 недели инкубации. Во всех случаях культуры после первого просмотра оставляют при комнатной температуре (17—18°) и еще раз описывают через 4 недели. Наблюдение за строением и размножением дрожжей проводят на живых культурах с помощью свето- оптического микроскопа. Капсулы выявляют приготовлением мазка в жидкой туши, т. е. методом негативного контрастирования ( 40). Способы размножения дрожжей исследуют в 3-суточной культуре на сусло-агаре или в жидком сусле. Для образования спор применяют также голодный агар. Если споры не обнаруживаются при инкубации в течение 3 сут при температуре 25°, то культуры оставляют при комнатной температуре и исследуют с недельным интервалом в течение 4—б недель. Псевдомицелий наблюдают на агаровых пластинках (предметное стекло, покрытое пленкой агаризованной среды).
Важным физиологическим признаком дрожжей является их способность к сбраживанию Сахаров до углекислого газа и этанола в анаэробных условиях. Для установления способности дрожжей к брожению используют метод с трубками Дунбара. Отдельные сахара растворяют в 0,5%-ном растворе дрожжевого экстракта. Конечная концентрация сахара — 2%. Растворы Сахаров разливают по трубкам Дунбара и автоклавируют 15 мин при 112°. При этом в слепом колене трубок нередко образуются пузырьки воздуха. Перед засевом их надо удалить, осторожно наклоняя трубку. Посев производят культурами с сусло-агара. Инкубация длится до 24 сут. О способности дрожжей сбраживать сахара свидетельствует образование газа в закрытом колене трубки.
|
|
|
|
К содержанию книги: И. П. БАБЬЕВА, Г. М. ЗЕНОВА, Д.Г.ЗВЯГИНЦЕВ
|
Последние добавления:
Вильямс. Травопольная система земледелия
Качинский - Жизнь и свойства почвы
Вернадский - химическое строение биосферы