|
Химические тесты для выявления желчных пигментов. ВЭЖХ |
|
К наиболее широко применяемым химическим тестам для определения желчных пигментов в сыворотке относится реакция Ван-ден-Берга.
При этой реакции пигменты билирубина под воздействием сульфаниловой кислоты теряют азот, хромогенные продукты определяются калориметрически.
С помощью реакции Ван-ден-Берга можно отличить непрямой билирубин от прямого в связи с разной растворимостью этих пигментов. Если реакция происходит в водной среде, то реагирует только водорастворимый прямой билирубин (так называемая прямая реакция Ван-ден-Берга).
Если же она происходит в метанол е, то внутримолекулярные водородные связи непрямого билирубина разрываются; таким образом, реакция как прямого, так и непрямого билирубина позволяет определить его общий уровень.
Количество непрямого билирубина можно рассчитать, если из величины, определяющей общее количество билирубина, вычесть величину, определяющую количество билирубина, полученную в прямой реакции Ван-ден-Берга.
При прямой реакции Ван-ден-Берга наиболее точными оказываются результаты, получаемые при продолжительности реакции в 1 мин. Если реакция продолжается дольше, то небольшое количество непрямого билирубина может начать реагировать в водной среде.
В результате, если реакция продолжается в течение 30 мин, то у больного с гипербилирубинемией, обусловленной непрямым билирубином, может быть определен ошибочно низкий уровень непрямого билирубина.
Это свидетельствует о том, что полученные при прямой и непрямой реакциях Ван-ден-Берга значения приблизительны (это не абсолютные значения).
Наиболее точный метод измерения количества билирубина в биологических жидкостях заключается в определении образования метиловых эфиров билирубина (щелочной метанолиз) и их концентрации с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Исследования, выполненные с помощью этого метода, показывают, что в норме в плазме содержится преимущественно непрямой билирубин и что лишь менее 4% от общего билирубина приходится на на прямую фракцию.
Это подтверждает давно существовавшее мнение о том, что определяемая методом Ван-ден-Берга небольшая величина прямого билирубина (1—3 мг/л) ошибочна, с помощью этой реакции определяется завышенное количество прямого билирубина, фактически содержащегося в плазме в норме.
Метод ВЭЖХ также позволяет определить, что у больного с болезнью печени и билирубинемией, обусловленной прямым билирубином, в сыворотке содержится значительное количество как моно-, так и диконъюгатов. Суммарно основные различия в свойствах и реакциях рассмотренных пигментов билирубина представлены в табл. 38-1.
Основные различия между прямым и непрямым билирубином
1 Эти свойства относятся к естественно образующемуся билирубину IXa. Другие геометрические разновидности и фотоизомеры ведут себя так же, как прямой билнрубин (см. текст). 2 Определяемый в плазме в условиях холестаза (см. текст).
Качественное определение билирубина в моче может осуществляться с помощью таблеток «Иктотест» или методом ныряющей палочки. Пенный тест также прост и позволяет дать качественную оценку. При энергичном встряхивании нормальной мочи в тест-пробирке пена будет совершенно белой, а при содержании в моче билирубина она приобретает желтую окраску. Это различие может быть трудно уловимым и становится очевидным только при непосредственном-сравнении образцов нормальной мочи и мочи, в которой содержится билирубин.
За исключением концентрированной мочи самой распространенной причиной ее темно-желто-коричневого окрашивания («темная» моча) бывает билирубинурия. Однако следует учитывать и возможность других механизмов и заболеваний, при которых моча становится темной.
К ним относятся желтый цвет мочи в результате приема лекарственных средств (например, сульфасалазина), красный ее цвет при порфирии, гемоглобин- и миоглобинурии или приеме лекарственных средств (например, пиридина), темно-коричневый или черный цвет, обусловленный присутствием гомогентизиновой кислоты (при охронозе) или меланина (при меланоме).
|
СМОТРИТЕ ТАКЖЕ:
Желудочно-кишечные заболевания - язвы, гастрит, запор, понос.
Справочник фельдшера. Внутренние болезни
ПОНОСЫ (диарея) — учащение выделения жидких каловых масс...
ЗАПОР — хроническая задержка стула св. 48 час. или ежедневное...
|
|
К содержанию книги: ВНУТРЕННИЕ БОЛЕЗНИ ЧЕЛОВЕКА. Расстройства пищеварения. Заболевания полости рта, желудка, кишечника
|
Последние добавления:
БОЛЕЗНИ СИСТЕМЫ КРОВООБРАЩЕНИЯ И ДЫХАНИЯ
Внешняя политика Ивана 4 Грозного Гоголь - Мёртвые души Орден Знак Почёта
Книги по русской истории Император Пётр Первый
ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ ЖИЗНИ ЧЕЛОВЕКА
Биогеронтология. Старение и долголетие человека